产品货号：
WH0161
中文名称：
Klenow酶
英文名称：
Klenow Fragment，5'-3' exo-
产品规格：
500U|2500U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是DNA Polymerase I的截短酶。该酶在模板和引物存在的条件下，以dNTP作底物，沿5'-3'方向催化与模板互补DNA的合成，同时本酶还具有3'-5'外切核酸酶的活性。通过截短改造，使本酶失去了5'-3'外切核酸酶的活性。本制品是通过大肠杆菌表达的重组酶，是Pol A基因截短型表达产物。分子量大小约为68.2kDa。
- 缺失了5'-3'外切核酸酶的活性。
- 酶比活性高，稳定性好，与其他酶兼容能力强。
- 在二代测序（NGS）应用中，主要用于文库构建过程中双链DNA片段的平端化处理。
- 寡核苷酸定向诱变中双链DNA的合成。
- 使用随机引物进行DNA标记。
- 双脱氧法DNA序列测定（Sanger法）。
1单位活力定义为在37℃、30min内，将10nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需的酶量。
| 组分 | 500U | 2500U |
| Klenow酶(5U/μL) | 100μL | 500μL |
| 10×Blue Buffer | 500μL | 1.5mL |
保存2～8℃，有效期1年。
100mM磷酸钾盐缓冲液，0.1mM EDTA，1mM DTT，50%甘油。
质量控制：
| 性质 | 描述 |
| 蛋白纯度 | ＞99% |
| 酶活性 | 5000U/mg |
| 单链外切酶活性 | 50U酶中，有活性 |
| 双链外切酶活性 | 50U酶中，有活性 |
| 双链内切酶活性 | 50U酶中，未检出 |
| 宿主基因组污染 | 50U酶中，＜10个拷贝 |
使用方法：
- 在NGS文库构建过程中，一般按终浓度0.01～0.1U/μL的量加入Klenow，也可根据实验具体情况来调整用量。
- 反应条件：37℃，3h。
- 反应结束以后，后续一般会进行产物纯化操作。
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